粪便样本先经过均质化处理方式
更新日期:2021-07-28     浏览次数:130
核心提示:2.2粪便样本预处理、粪便DNA和组织DNA提取本文报道的粪便DNA提取主要操作流程如下:(1)粪便样本预处理:粪便样本先经过均质化处理方式,将处理后的

2.2 粪便样本预处理、粪便DNA和组织DNA提取

本文报道的粪便DNA提取主要操作流程如下:(1)粪便样本预处理:粪便样本先经过均质化处理方式,将处理后的粪便上清置于-20℃冰箱预冷1小时,13000g离心3分钟后吸取中间层上清液。向上清中加入4%的PVP交联剂后颠倒混匀,13000g离心3分钟后弃去沉淀,上清液用于核酸提取。(2)粪便DNA提取:取800uL预处理后的粪便上清液加入裂解管中震荡混匀后离心,转移全部上清后加入蛋白酶K和裂解液,70℃温育10分钟,然后加入核酸结合液和氧化硅磁珠混匀2分钟后弃去上清,加入500 uL洗涤液A和洗涤液B洗涤2次,最后使用100 uL的Low TE缓冲液从磁珠上洗脱吸附的DNA,-20℃条件下保存待用。