1.2.1表达载体的构建  在NCBI官网查询并获取了猫血清白蛋白的cDNA基因序列（序列号NM_001009961），全长1821bp，根据FSA的氨基酸序列以及毕赤酵母密码子的偏爱性优化密码子，将其交付南京金斯瑞生物科技有限公司进行化学合成并通过酶切位点 EcoR Ⅰ和NotⅠ插入载体pPIC9K上，命名为FSA-pPIC9K，以便后续研究。

1.2.2 转化E.coli DH5α感受态细胞  取2μL FSA-pPIC9K重组质粒与E.coli DH5α感受态细胞轻轻混匀，静置后于45℃水浴中热激45s， 冰盒中静置，接种于不含抗生素的LB液体培养基中，于37℃摇床复苏1h，之后涂布于含有抗生素的LB平板上，37培养过夜。挑去单菌落于LB液体培养基中，37℃培养16h，用质粒小提试剂盒提取质粒，并进行1%琼脂糖凝胶电泳检测。

1.2.3 PCR验证  根据优化后FSA的碱基序列设计一对引物（如表1），并交由上海生工合成，为保证扩增的保真性，本实验采用Q5高保真聚合酶进行目的基因的扩增（如表2，表3），将PCR产物进行1%琼脂糖凝胶电泳检测。