使用所建立的荧光RPA进行检测
更新日期:2021-09-03     浏览次数:97
核心提示:1.2. 5 鼠疫耶尔森菌荧光RPA特异性检测为了确定鼠疫耶尔森菌荧光RPA的特异性,分别将金黄色葡萄球菌、链球菌、产气荚膜梭菌、单核李斯特菌、红斑丹毒

1.2. 5 鼠疫耶尔森菌荧光RPA特异性检测

为了确定鼠疫耶尔森菌荧光RPA的特异性,分别将金黄色葡萄球菌、链球菌、产气荚膜梭菌、单核李斯特菌、红斑丹毒丝菌、大肠杆菌、沙门氏菌、布鲁氏菌、巴氏杆菌、嗜血杆菌等常见细菌的DNA混合为革兰氏阳性菌和阴性菌的混合样品,然后作为样品进行荧光RPA检测,判定所建立的荧光RPA的特异性。

1.2.6 鼠疫耶尔森菌荧光RPA灵敏性检测

将质粒模板进行10倍梯度稀释,分别稀释为103~101copies/μL的浓度,然后分别吸取1μL作为模板配成反应体系,放入T8中进行检测。

1.2.7 模拟样品的检测

采用双盲法,以鼠疫耶尔森菌的质粒和大肠杆菌的DNA为材料,人为配制成50份含有不同浓度质粒的人工模拟样品,使用所建立的荧光RPA进行检测。将检测结果与质粒混合情况进行比对,判定检测的准确性。