挑选菌落形态明显不同的菌株
更新日期:2022-01-25     浏览次数:79
核心提示:1.2.3吡虫啉降解菌株的分离纯化和初步鉴定将连续稀释涂布和画线分离法相结合,利用含IMI浓度为100 mg/L基础无机盐培养基从BCL菌群中分离菌株。挑选菌

1.2.3吡虫啉降解菌株的分离纯化和初步鉴定

将连续稀释涂布和画线分离法相结合,利用含IMI浓度为100 mg/L基础无机盐培养基从BCL菌群中分离菌株。挑选菌落形态明显不同的菌株,再将其分别转接到牛肉膏蛋白胨培养基和LB培养基,进一步对比菌落形态后剔除相似菌株,将最后获得的菌株编号并保藏。采用TIANGEN 基因组 DNA 提取试剂盒步骤要求提取各菌株的 DNA 作为模板,采用16S rRNA 通用引物 27F /1492R扩增目的片段。PCR扩增产物送至上海生工进行测序。菌株16S rRNA 基因序列测序后,在 NCBI 网站上进行相似度比较,并提交到 GenBank 数据库获得菌株序列注册号MW822752(BLE8)、MW822757(BLE10)、OL942751(BCJ1)和MW822754(BLE3-1)。利用 Mega-7软件对获得的菌株 16S rRNA 序列进行多序列拼接,构建系统发育树[25]

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