（1）L.reuteri发酵上清液的培养

用一次性无菌接种环分别从MRS琼脂平板上挑取单个L.reuteri菌落接种到5 mL新鲜MRS肉汤培养基中，37 ℃过夜厌氧培养，将活化的L.reuteri菌液摇匀，按1 %的接种量接种到5 mL MRS肉汤培养基37 ℃，厌氧培养12 h后，12,000 rpm离心5 min收集菌体，用PBS洗涤菌体沉淀，12,000 rpm离心5 min弃上清。将收集到的7株L.reuteri菌体沉淀2份分别添加到7管5 mL新鲜 M9培养基和改良M9培养基（+0.6 μmol/L色氨酸）中培养48 h，12,000 rpm离心5 min取上清液待用。

（2）样品前处理

取L.reuteri发酵上清液5 mL，加200 μL的甲醇，摇匀，用PBS缓冲液调节pH至6-7。加入2.5 mL乙酸乙酯萃取，剧烈震荡30 s，静置3 min，重复3次。收集乙酸乙酯层液体于15 mL离心管中，加入少量无水硫酸钠干燥5 min，氮气常温吹干，用150 μL甲醇复溶后上机检测。