抑制VEGFA表达治疗NSCLC的生长
更新日期:2022-06-13     浏览次数:80
核心提示:1.2实验用药物,细胞培养及传代、冻存消积饮口服液由黄芪、补骨脂、云芝、白花蛇舌草、莪术、全蝎、蜈蚣、大黄八味中药熬制而成。消积饮药物制备:将

1.2实验用药物,细胞培养及传代、冻存

消积饮口服液由黄芪、补骨脂、云芝、白花蛇舌草、莪术、全蝎、蜈蚣、大黄八味中药熬制而成。消积饮药物制备:将广州中医药大学第二临床医学院药剂科按照常法制备呈每毫升含生药0.67g的消积饮口服液(产品批号171002、 180902),将其分装至每个EP管1 mL后,置于真空高速浓缩仪进行浓缩制成每毫升含生药2.5g,需要时加入培养液制备成1g/mL 浓度储存液后经0.22μm滤器无菌过滤后,置于4℃保存,需要时使用完全培养基进行稀释至实验浓度。用完全培养基(RPMI1640培养基,含约8%胎牛血清)培养细胞,细胞贴壁生长至培养皿底约75-85%汇合度时,予以传代。

细胞冻存:依照传代方式消化细胞后,将细胞收集至离心管中,置于常温低 速离心机中离心,120×g,5min离心后弃去上清,另外予以细胞冻存液(20%胎牛血清,10%细胞用DMSO,70%RPMI1640培养基)重悬细胞呈单细胞悬液,按每 管1mL含有约1*107个细胞分装至冻存管中,置于程序降温盒中放置-80℃冰箱 中保存,第二天转移至液氮中长期保存。