MiR-1298-5p对绒山羊毛囊发育相关基因的调控研究
更新日期:2019-11-20     来源:中国饲料   作者:徐晶  浏览次数:9
核心提示:MiR-1298-5p对绒山羊毛囊发育相关基因的调控研究摘要:(目的)探讨miR-1298-5p及其靶基因与绒山羊毛囊生长发育的关系。(方法)以辽宁绒山羊不同发育时期

 MiR-1298-5p对绒山羊毛囊发育相关基因的调控研究

摘  要:(目的)探讨miR-1298-5p及其靶基因与绒山羊毛囊生长发育的关系。(方法)以辽宁绒山羊不同发育时期皮肤毛囊组织为材料,通过生物信息学方法预测miR-1298-5p的靶基因,采用Western blot对miR-1298-5p的靶基因FGF2进行定量检测;扩增靶基因3'UTR区,构建野生型和突变型靶基因表达载体后与miR-1298-5p mimics共同转染到HEK293T/17细胞中,利用双荧光素酶报告基因实验验证miR-1298-5p与靶基因的靶向关系。(结果)生物信息学方法预测结果显示:FGF2基因3'UTR区含有miR-1298-5p结合位点,FGF2为miR-1298-5p潜在靶基因,通过蛋白水平定量表达规律发现miR-1298-5p与靶基因FGF2呈负调控关系,初步确定FGF2为miR-1298-5p的靶基因。双荧光素酶报告基因实验显示,miR-1298-5p mimics能够抑制野生型FGF2的靶位点报告载体的荧光素酶活性;但当靶基因结合位点突变后,FGF2被抑制的荧光素酶活性能够得到恢复。结论: miR-1298-5p与FGF2有靶向关系,miR-1298-5p能通过负调控FGF2表达调控羊皮肤毛囊发育。

关键词:辽宁绒山羊;皮肤毛囊;miR-1298-5p;FGF2;双荧光素酶报告基因实验