塑料制片技术制片以观察杜仲胶
更新日期:2022-02-26     浏览次数:112
核心提示:1材料与方法实验用植物杜仲,种植于临沂大学教学实习与科研基地。杜仲胶是不饱和脂类,基于不饱和脂类的组织化学方法[15],采用四氧化锇处理杜仲叶片

1  材料与方法

实验用植物杜仲,种植于临沂大学教学实习与科研基地。

杜仲胶是不饱和脂类,基于不饱和脂类的组织化学方法[15],采用四氧化锇处理杜仲叶片,然后用塑料制片技术制片以观察杜仲胶。杜仲胶与天然橡胶是顺反异构体,前人对橡胶做过电镜观察[8-9],本实验借鉴同样方法观察杜仲胶。具体做法如下:取杜仲叶,切成小块,置于2%戊二醛(SPI Supplies)溶液中处理12 h,再转入1%四氧化锇(Pella INC)溶液中处理4 h,样品脱水后包埋于Epon-812树脂(EMS)中。用超薄切片机(Ultracut R,Leica)切薄切片(厚度1 μm)和超薄切片(厚度60~70 nm)。薄切片不染色或用甲苯胺蓝-O染色,于光学显微镜下观察,如果有胶滴,将会显示棕色,据此可以了解含胶细胞的分布范围,即杜仲胶在哪些组织中分布。超薄切片用醋酸双氧铀和柠檬酸铅(EMS)做电子染色,于透射电子显微镜(Tecnai 12,Philips)下观察胶滴。