过氧化物酶封闭液阻断内源过氧化物酶活性
更新日期:2022-03-16     浏览次数:126
核心提示:1.1免疫组织化学染色 石蜡切片脱蜡和再水化后,在EDTA组织修复液中进行抗原修复。随后使用过氧化物酶封闭液阻断内源过氧化物酶活性,用5%牛血清白蛋白

1.1 免疫组织化学染色 石蜡切片脱蜡和再水化后,在EDTA组织修复液中进行抗原修复。随后使用过氧化物酶封闭液阻断内源过氧化物酶活性,用5%牛血清白蛋白阻断非特异性内源性免疫反应抗原。随后,滴加抗EIF3B抗体(1:200)作为4◦C孵育过夜。用PBS洗涤后,用辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗室温孵育30 min。用PBS洗涤后,滴加二氨基联苯胺(DAB)显色液,然后进行复染苏木精。最后,对切片进行脱水和透化处,用环氧树脂封片。随机观察10个200倍镜视野,按阳性细胞所占比例计分:<5%为0分,5%~30%为1分,31%~60%为2分,>60%为3分;按染色强度计分:无色为0分,淡黄色为1分,棕黄色为2分,棕褐色为3分。将阳性染色细胞比例与染色强度相乘:≤3分为EIF3B低表达组,>3分为EIF3B高表达组。