一株鸭3型腺病毒分离鉴定及其Fiber-2基因的克隆表达
更新日期:2019-09-19     来源:中国兽医科学   作者:马靖雯  浏览次数:173
核心提示:一株鸭 3 型腺病毒分离鉴定及其 Fiber-2 基因的克隆表达摘要:该研究首先从一例疑似腺病毒感染的鸭肝组织中,通过接种 LMH 鸡肝细胞以及 PCR 鉴定,分

一株鸭 3 型腺病毒分离鉴定及其 Fiber-2 基因的克隆表达

摘要:该研究首先从一例疑似腺病毒感染的鸭肝组织中,通过接种 LMH 鸡肝细胞以及 PCR 鉴定,分离到一株鸭 3 型腺病毒,命名为 GDMJW2019。随即对 GDMJW2019 毒株的纤突 蛋白 Fiber-2 基因进行了原核及真核表达载体构建,重组子分别命名为 pCold-I-F2 以及 pcDNA3.1-F2。经 IPTG 诱导,SDS-PAGE 以及 Western Blot 分析发现 pCold-I-F2 原核表达 载体可高效表达 Fiber-2 融合蛋白。利用纯化 Fiber-2 融合蛋白免疫小鼠获得了抗 Fiber-2 融 合蛋白的小鼠多克隆抗体。间接免疫荧光试验证明,制备的抗 Fiber-2 融合蛋白的小鼠多克 隆抗体不仅能与转染真核表达载体 pcDNA3.1-F2 的 LMH 细胞反应特异性反应,而且能特异 性识别感染 GDMJW2019 的 LMH 细胞。以上鸭 3 型腺病毒 GDMJW2019 的分离鉴定、Fiber-2 蛋白克隆表达及其小鼠多抗的研制对进一步探究鸭 3 型腺病毒发病机制,研制特异性诊断及 免疫防控技术打下了基础。

关键词:鸭 3 型腺病毒;分离;Fiber-2 表达;小鼠多克隆抗体

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